婦科病理學護理改革與實踐范文

本站小編為你精心準備了婦科病理學護理改革與實踐參考范文，愿這些范文能點燃您思維的火花，激發您的寫作靈感。歡迎深入閱讀并收藏。

本文作者：于月新李巨陳佳樊寶劍顏宇博單位：解放軍第二0二醫院婦產科沈陽

附件扭轉(adnexaltorsion，AT)是婦科常見急腹癥之一。以往常規治療是行急診手術切除附件以防卵巢靜脈血栓脫落、缺血再灌注(IR)損傷、卵巢壞死等。但卵巢扭轉患者常以未成年或生育期女性居多[1]，而且扭轉的卵巢病變往往為良性，甚至扭轉的卵巢本身并無病變[2]，使首選手術切除扭轉附件的治療原則受到置疑。蒂扭轉發生后，卵巢靜脈和動脈血流依次受阻[3]，進而導致卵巢組織發生充血、水腫和缺血性損傷，如不及時診治可造成卵巢不可逆轉的壞死、破裂及感染等嚴重并發癥。及時判斷附件扭轉后卵巢的活力對成功保留卵巢至關重要。本實驗通過建立兔附件扭轉模型研究附件扭轉后卵巢早期病理學改變，探討不同扭轉時間對卵巢的組織學和一氧化氮合成酶(iNOS)影響。材料和方法

1實驗動物及分組雌性成年日本大耳白兔40只，8-12月齡，體質量2.5-3.0kg，由沈陽軍區總醫院實驗動物中心提供[合格證號：SCXK(軍)2007-001]。采用隨機數字法分為2組，實驗組(n=32)和對照組(假手術組，n=8)，實驗組再按隨機排列表法隨機分成附件扭轉后24、48、72、96h4組，每個時相點8只。本研究遵循國家實驗動物管理條例及國家實驗動物管理實施細則，符合國際實驗動物要求及動物倫理學要求。所有動物采用籠中獨立飼養方法，自由飲食，適應性飼養1周后進行實驗。

2實驗器材及試劑顯微鏡(型號OLYMPUSBX51TF)，離心機(HERAEUSPico17，Thermo公司)，紫外分光光度計(UV-1700Pharmaspec，Shimadzu公司)，恒溫水浴(HH-2型，江蘇金松科技儀器廠)。手術剪2把，血管鉗4把，持針器1把，5×12圓針1枚，8×20三角針1枚，4號縫線，彎頭鑷1把，刀片1把。氯胺酮。羊抗兔iNOS多克隆抗體(一抗)、即用型SABC試劑盒(包括正常封閉血清、生物素化二抗、SABC、抗原修復液、復合修復液)及DAB染色液等購自武漢博士德生物工程有限公司。

3模型制作雌性成年日本大耳白兔稱重后氯胺酮40mg/kg肌肉注射，待四肢松軟、睫毛反射消失后將其仰臥固定于手術臺。腹部備皮后予安爾碘消毒，鋪巾。取下腹部正中切口長約6cm，逐層切開入腹腔，暴露雙側子宮和輸卵管、卵巢，觀察并記錄其大小及顏色。將實驗組兔的左側附件按順時針方向旋轉3周，將之固定于左側腹壁。假手術組僅開腹后提拉出左側附件至切口，再放回原處關腹。實驗組分別于扭轉24、48、72、96h后開腹拆除縫線，將扭轉的卵巢和輸卵管松解并復位，觀察卵巢血運的恢復情況，摘除雙側卵巢；假手術組96h后取雙側卵巢。

4附件扭轉后卵巢組織形態學觀察將卵巢組織浸泡于10%甲醛溶液中，乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟浸透、包埋，切片機連續切片，厚度為4μm，蘇木精2伊紅(HE)染色，光鏡下觀察組織形態學變化。Olympus光學顯微鏡下隨機選擇5個視野觀察病理組織學切片檢測卵巢組織水腫、充血、出血、壞死程度。參考Diskensoy等[4]標準進行組織病理學評分(表1)。其中0分為無損傷，1分為輕度損傷，2分為中度損傷，3分為重度損傷(壞死)。

5卵巢iNOS表達和指標檢測取摘除之左側余1/2卵巢，固定后石蠟切片，檢測iNOS的表達。iNOS表達的結果判定(采用雙盲法閱片)：iNOS以胞漿出現棕黃色顆粒作為陽性標準；結合染色強度和陽性細胞數分級，每一切片隨機用顯微鏡選取3個視野(×100)，在高倍鏡(×400)選取100個細胞，計算陽性細胞所占百分數。<10%為0分，10%-25%為1分，26%-50%為2分，>51%為3分。按著色程度計分:基本未著色、染色與背景相似者為0分；著色淺、略高于背景者為1分；中度著色、明顯高于背景者為2分；強染、著色深棕者為3分。兩項合并0-1分為陰性(-)，2分為陽性(+)，>3分為強陽性(++)。

6統計學方法用SPSS17.0統計軟件進行分析，計量資料用-x±s分析，分類資料采用χ2檢驗。病理評分比較采用Kruskal-WallisH秩和檢驗，多個獨立樣本間的多重比較采用擴展的t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

結果

1模型一般狀態40只兔均存活，對照組及實驗組左卵巢扭轉24、48、72、96h后各組肛溫、心率、呼吸頻率兩組比較差異無統計學意義。

2卵巢組織肉眼所見實驗組各時相點兔二次開腹后，可見腹腔內程度不等粘連，子宮及右附件未見明顯異常，左側卵巢及輸卵管呈程度不等的水腫、充血、出血、紫色或黑色，并隨著時相點的推移而加重。實驗組缺血24h后5只(5/8)兔卵巢及輸卵管呈淺紅色，2只(2/8)呈深紅色，1只(1/8)呈藍黑色；缺血48h組有2只(2/8)卵巢及輸卵管呈淺紅色，3只(3/8)呈深紅色，3只(3/8)呈藍黑色；而缺血72h組6只(6/8)呈藍黑色。而對照組及實驗組右側卵巢未見明顯異常。

3病理形態學改變實驗組兔左卵巢扭轉24h后卵巢細胞間隙增寬，輕度充血水腫，少量中性粒細胞、淋巴細胞浸潤(圖1C)。48h后炎性細胞浸潤加重，細胞水腫充血明顯，72h后見大量炎性細胞浸潤，細胞腫脹變性，結構損壞和局灶性壞死(圖1D)；96h見重度水腫，濁腫、破裂。彌漫性細胞壞死，細胞濁腫退變、崩解，結構模糊(圖F)。假手術組及右側卵巢標本(圖1A、B)細胞結構完整、清晰，未見壞死。

4卵巢組織病理評分實驗組左側卵巢vs右側卵巢24h(5.23±1.20)vs(0.65±0.51)，P<0.05；48h(7.81±1.29)vs(0.59±0.42)，P<0.01；72h(7.49±1.43)vs(0.67±0.61)，P<0.01；96h(8.37±1.19)vs(0.73±0.61)，P<0.01。而假手術組左側卵巢與實驗組右側卵巢相比無明顯變化(P>0.05)。

5iNOS在兔卵巢組織中的表達實驗組卵巢均有iNOS程度不等表達，隨時間進展，72h組表達達高峰，96h下降。見表2。

討論

附件扭轉(AT)是婦科急診手術第五大常見病因，發病率為2.7%[5]。附件扭轉多發生于青春期女孩及育齡婦女，且扭轉的卵巢病變往往為良性，甚至扭轉的卵巢本身并無病變，手術切除造成器官及相應功能損失是令人遺憾的。附件扭轉對卵巢形態學影響，AT發生后卵巢靜脈內血液回流首先受阻，卵巢靜脈內易形成血栓。有研究表明附件缺血-出血性的藍黑色外觀是靜脈、淋巴瘀滯的結果而不是壞疽[3]，扭轉附件的顏色、大小、水腫程度通常并不能反映卵巢組織真實的損傷情況，因此附件扭轉后如何判斷卵巢是否能夠有效保留一直是人們研究的焦點。有研究表明[6-7]卵巢充血是繼靜脈瘀滯后造成

附件缺血壞死外觀的第二個原因。本實驗中實驗組顯示附件扭轉發生后卵巢的顏色與各自缺血時間呈逐漸遞增關系，72h損傷達高峰，組織病理學評分最高。而假手術組及右側卵巢標本細胞結構完整、清晰，僅個別見輕度水腫及少量炎性反應，卵巢隨著扭轉時間延長光鏡下見組織內炎性細胞浸潤、腺細胞結構損壞和局灶性壞死增多，表明附件扭轉后卵巢的形態學改變具有時間依從性。

iNOS蛋白在組織中的表達，一氧化氮(nitricoxide，NO)作為第二信使和神經遞質，是細胞間信息傳遞的主要調節因子，也是介導細胞免疫和細胞毒性反應的主要物質，參與機體多種生理和病理過程。內源性一氧化氮是由一氧化氮合成酶(induciblenitricoxidesynthase，iNOS)催化L-精氨酸胍基末端上的氮氧化而成。人體內有3種不同形式的同工酶即神經型NOS(nNOS)、內皮型NOS(eNOS)和誘導型NOS(iNOS)，誘導型NOS(iNOS)在創傷、休克等病理狀態下表達明顯增高，以致NO過量生成，可與超氧陰離子反應生成更具氧化活性的過氧亞硝酸鹽，加劇組織灌注障礙和損傷。本實驗發現卵巢扭轉發生時iNOS蛋白在組織中的表達水平呈顯著性升高，AT組卵巢均有iNOS程度不等表達，隨時間進展，72h組表達達高峰，96h下降。這表明兔附件扭轉后造成卵巢缺血，卵巢組織產生了脂質過氧化反應，因此導致了氧化性損傷，其變化與扭轉時間有關，且與扭轉后卵巢局部病理組織變化一致。綜合兔附件扭轉后卵巢的肉眼所見、病理組織學觀察和iNOS在兔卵巢組織中的表達初步認為附件扭轉72h后卵巢發生不可逆改變、再灌注損傷加劇，是臨床處理附件扭轉并保留卵巢的時間臨界點。