牛副流感病毒的研究范文

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摘要：

我國牛群中普遍存在牛副流感病毒3型（BPIV3）的感染，嚴重危害著我國養牛業的發展。本文簡要介紹了BPIV3的臨床表現、流行病學、病原學、致病性、診斷技術和疫苗研發以及防控技術7個方面的內容。研究表明，開發出有效疫苗是控制BPIV3的理想手段，對預防由BPIV3引起的牛呼吸道疾病具有重要意義。

關鍵詞：

牛副流感病毒3型；呼吸道疾病；研究進展

牛副流感病毒3型（Bovine.parainfluenza.virus.3,.BPIV3）屬于單分子負鏈RNA病毒目（Mononegavirles）副黏病毒科（Paramyxoviridae）副黏病毒亞科（Paramyxovirinae）呼吸道病毒屬（Respirovirus）的成員，是引起犢牛呼吸道疾病的主要病原之一。1959年Reisinger等[1]和Hoerlein[2]等在美國的牛體中首次分離到BPIV3，同時在這些動物中查出了該病毒的抗體。目前，BPIV3廣泛流行于世界各國，在美洲、歐洲、亞洲各國均不斷發生或流行。研究表明牛傳染性鼻氣管炎病毒（IBRV）、BPIV3、牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）和牛呼吸道合胞體病毒（BRSV）是目前已知的引發牛呼吸道傳染病的主要病毒性病原[3,4]。近年來，我國山東、黑龍江、遼寧和內蒙古等多個省份發生了嚴重的犢牛呼吸道疾病綜合征，造成很大的經濟損失。經流行病學調查和病原學檢測，表明BPIV3在犢牛呼吸道疾病綜合征中起重要作用。2008年，我國首次從病牛鼻拭子中分離出BPIV3，并進行了全基因組序列測定，進化樹分析表明該分離株為一新的基因型，定義為BPIV3基因C型，此為世界首次報道[5]。隨后南美的阿根廷及亞洲的韓國亦報道了BPIV3基因C型的存在[6,7]。血清流行病學調查顯示，我國部分地區BPIV3的血清陽性率高達77.6%(1936/2489)[8]，應引起行業的高度重視，否則將危害我國養牛業的發展。本文就我國BPIV3的研究進展做一介紹。

1臨床表現

牛體感染BPIV3后的潛伏期一般為2~5d。病牛出現體溫升高、食欲不振、精神萎靡等癥狀，體溫最高可達.41℃以上，流淚、流鼻液、咳嗽，嚴重病例表現為呼吸困難。隨著病情的加重而繼發細菌或支原體感染，如多殺性巴氏桿菌、溶血性曼氏桿菌、牛支原體感染等，從而引起嚴重的肺炎，導致呼吸道疾病綜合征，致使死亡率大大增加[9]。

2流行病學

據王海軍等[8]報道，從黑龍江、遼寧、新疆、云南、貴州、廣西、河北、山東、河南、江西、湖南和福建12個省（區）采集牛血清樣品2.489份，用血清中和試驗進行BPIV抗體檢測，顯示BPIV3抗體陽性率為77.6%(1936/2489)。其中江西省牛血清抗體陽性率為27.8%，其他省份陽性率均高于50%，2/3的省份樣品陽性率超過80%，福建省樣品陽性率高達100%。朱遠茂于2014年用中和試驗檢測黑龍江省BPIV3血清抗體陽性率為97.06%（463/477）（未發表）。

3病原學

2008年，朱遠茂等[5]從山東采集的病牛鼻拭子中分離出4株BPIV3，對其中的一株BPIV3.SD0835進行了全基因組序列測定，進化樹分析表明與國內2008年黑龍江分離的DQ1株（屬于基因A型）和2009年內蒙古分離株NM09株（屬于基因A型）差異較大[10,11]，與國外已經公開發表的BPIV3基因A型和基因B型序列亦有較大差異，表明我國分離株為一新的基因型，定義為BPIV3基因C型，屬于世界上首次報道基因C型。隨后在黑龍江省、遼寧省和江蘇省亦分離或檢測到了BPIV3基因C型。近兩年，朱遠茂等[12]從發病現場送檢樣品中多次檢測到BPIV3，主要為基因A型和C型，未檢測到基因B型，基因B型在我國是否存在還有待進一步研究。

4致病性

將BPIV3接毒Balb/c.小鼠，24h后即可從小鼠肺及氣管中檢出病原。肺組織中病毒RNA的拷貝數明顯高于氣管組織。組織病理學變化主要以肺泡間隔增寬、局灶性纖維素性肺炎為主。豚鼠接毒BPIV3后表現出呼吸道相關的臨床癥狀，解剖學可見肺臟暗紅、實變。組織病理學變化包括肺泡間隔增寬和纖維素性肺炎。利用病毒分離滴定、實時RT-PCR.和免疫組化在接毒24h呼吸道組織中檢測到了病毒復制。IHC染色揭示了肺臟和氣管是BPIV3主要復制的組織部位[13]。奶牛經BPIV3攻毒后表現精神沉郁、流鼻液、眼有分泌物、咳嗽、呼吸困難等臨床癥狀，有的表現體溫升高并且可從鼻腔排毒。病理變化表現為肺泡壁毛細血管擴張、淤血，肺泡腔內有少量紅細胞散在，伴有少量漿液析出；氣管黏膜層消失；淋巴小結內淋巴細胞有輕微減少，部分淋巴細胞出現凋亡；肝臟、脾臟、腎臟和心臟無明顯病理變化[12]。

5診斷技術

病原學診斷：董秀梅等[14]基于BPIV3.M基因建立了TaqMan實時熒光定量RT-PCR，用于快速定量檢測BPIV3。該方法特異性強、敏感性高、重復性好，可用于人工感染樣本的檢測。牛呼吸道疾病大多呈現多病原感染，一般先由病毒感染，引起機體免疫抑制，再繼發細菌感染，最終導致牛呼吸道疾病綜合征，引起牛嚴重呼吸道疾病，使養牛業蒙受重大的經濟損失，嚴重危害養牛業的健康發展。所以，很有必要建立同時檢測牛呼吸道病多病原的診斷方法。目前已建立了同時檢測牛病毒性腹瀉病毒、牛副流感病毒3型和牛呼吸道合胞體病毒3種病毒的多重RT-PCR診斷方法，該方法具有特異、快速、準確的特點，可用于對這3種病毒的同時檢測和鑒別診斷[15]。血清學診斷：中和試驗是該病常用的血清學診斷方法，同時是該病血清學診斷的“金標準”，具有很高的可信度。血凝試驗和血凝抑制試驗因為成本低、操作方便、能在短時間內獲得結果等優點也是該病常用的檢測方法，所用紅細胞多為豚鼠或雞紅細胞[16]。

6疫苗研發

BPIV3經細胞培養并滅活后與油佐劑乳化可制成BPIV3滅活疫苗。實驗室試驗證實了BPIV3滅活疫苗對牛是安全的，可誘導接種牛產生較高滴度的中和抗體。牛經BPIV3滅活疫苗免疫后，可抵抗強毒株的攻擊[2]。但該疫苗目前尚未上市。

7防控技術

由于有關疫苗尚未上市，目前尚無BPIV3特異性防控手段。據報道，沙冬青總生物堿具有較強的體外抗牛副流感病毒3型的作用。采用綜合作用方式給藥時，其對BPIV3感染的治療指數高達25.76，表明沙冬青總生物堿的作用效果與其毒性之間的相對距離較大，說明沙冬青總生物堿對BPIV3有寬廣的安全質量濃度范圍[17]。

8結束語

調查表明，我國牛群中已經普遍存在BPIV3的感染，嚴重危害著我國養牛業的發展。現階段我國對該病的研究還處于對病原的分離、檢測等初級階段，在臨床預防和治療中還沒有安全、高效的疫苗。隨著我國養牛業的集約化發展，不少牛舍養殖密度大、空氣質量差，這些因素的存在為該病的傳播和流行提供了可能，所以深入開展BPIV3的研究，盡快開發出有效疫苗是控制BPIV3的理想手段。BPIV3的控制對預防牛呼吸道疾病的發生具有重要意義。

作者：徐子晟 朱遠茂 單位：農業部農業機械試驗鑒定總站 中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所牛羊傳染病創新團隊