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【摘要】目的研究滴通鼻炎水對蛙口腔黏膜纖毛運動的影響。方法采用蛙黏膜纖毛運動實驗,用肉眼觀察給藥后小木屑在蛙上顎黏膜表面移動一定距離所需要的時間；用顯微鏡觀察生理鹽水組和滴通鼻炎水組對離體蛙口腔上顎黏膜纖毛持續擺動時間的影響；蛙口腔上顎黏膜用生理鹽水或滴通鼻炎水浸潤30min后，分離蛙口腔上顎黏膜，用顯微鏡觀察其纖毛持續擺動時間。結果①在整體動物實驗中，滴通鼻炎水常用濃度、高濃度組給藥前后對蛙黏膜纖毛運動均無明顯影響（P>0.05）；②在離體實驗中，滴通鼻炎水常用濃度、高濃度組對蛙黏膜纖毛運動亦無明顯影響（P>0.05）；③在半在體法實驗中，滴通鼻炎水對蛙纖毛運動持續時間有明顯縮短作用（P<0.05），但作用強度顯著弱于陽性對照藥去氧膽酸鈉。結論滴通鼻炎水在整體實驗和離體實驗中對蛙黏膜纖毛的功能無明顯影響，但滴通鼻炎水浸潤30min后對黏膜纖毛運動有抑制作用。
【關鍵詞】滴通鼻炎水；纖毛運動；毒性
Abstract:ObjectiveToevaluatetheinfluenceofDitongnasitisdroponfrogpalatemucosaciliamovement.Methods①Recordthetimespanofthesmallchipsmovingonthesurfaceoffrogpalatemucosabyeyes;②Observationofthetimespanoffrogpalateciliumcontinuingsegmentalmotionindrugsolutionundermicroscope;③Observationthetimespanoffrogpalateciliumcontinuingsegmentalmotionaftersufficienteffectbydrugsolutionundermicroscope.Theabovewereusedasindicatorstoexaminetheeffectsofdifferentdrugconcentrationsonfrogpalatemucosaciliamovement.Result①Noapparenteffecthasbeenfoundonfrogmucosaciliummovementatthenormaldosageandhighdosage(theconcentrationofwhichare0.395gcrudedrug/mL&1.58gcrudedrug/mL)ofDitongnasitisdrophaddividedlyactedonfrogmucosacilia,withthedifferencesofnostatisticsignificance（P>0.05）inanimaltest;②NoobviouseffecthadbeenfoundonfrogmucosacilialmovementatthenormaldosageandhighdosageofDitongnasitisdroprespectively,withthedifferencesofnostatisticsignificance（P>0.05）invitro;③Effecthadbeenobservedonweakeningthecontinuingmovementoffrogmucosaciliainvitro,indicatingthatDitongnasitisdropinhibitscilialmovementwhenactingonfrogmucosaciliaforarelativelylongtime（P<0.05）.Buttheintensityismuchweakerthanpositivecontrolwithdeoxysodiumcholate.ConclusionDitongnasitisdrophadnoremarkableeffectoninjuringthefunctionoffrogmucosacilia.
Keywords:Ditongnasitisdrop;cilialmovement;toxicity
滴通鼻炎水由蒲公英、麻黃、黃芩、石菖蒲、蒼耳子、辛夷等組成，具有消炎止痛、抗過敏功能，用于傷風鼻塞、急慢性鼻炎。理想的滴鼻劑或噴霧劑在治療疾病的同時，不應對鼻黏膜纖毛運動產生抑制作用。為了評價滴通鼻炎水對鼻黏膜纖毛運動有無影響，本研究采用蛙黏膜纖毛運動實驗，評價該藥對鼻黏膜纖毛運動的影響，為臨床安全用藥提供參考。
1材料
1.1藥物滴通鼻炎水，批號：M1004，規格：10mL/瓶，廣州白云山制藥股份有限公司白云山外用藥廠生產。質量濃度為0.395g生藥/mL，作為低劑量組用藥。滴通鼻炎水浸膏（與配制上述成藥同一批提?。?，按處方投料提取濃縮制成，廣州白云山制藥股份有限公司白云山外用藥廠生產，質量濃度為4.266g生藥/g。試驗時用生理鹽水配成質量濃度為1.58g生藥/mL，為成藥濃度的4倍，作為高劑量組用藥。
去氧膽酸鈉，Sigma產品，批號（lot）：61H0536。試驗時，用生理鹽水配成ρ=1%去氧膽酸鈉溶液備用。
1.2動物蛙80只，體質量60~80g，雌雄兼用,粵監正字2006C081號。
2方法與結果
2.1滴通鼻炎水對蛙黏膜纖毛運動的影響取30只蛙，隨機分成3組，即滴通鼻炎水低劑量組、滴通鼻炎水高劑量組、1%去氧膽酸鈉組。
將蛙仰位固定于蛙板上，下頜扳開，用線貫穿，拉向下方并固定。并用圖釘釘住上頜，使上頜的黏膜面得以充分暴露，不時用生理鹽水少許濕潤暴露的黏膜面。
于兩眼窩前緣間的黏膜上置放芝麻大小的軟木屑一粒。由于黏膜上皮的纖毛運動，將能看到小木屑逐漸向食道口方向移動。以上下頜角之間作為終點，用秒表記錄木屑從起始線移動到終點線所需時間(s)，連試3次，求出其平均值。然后用滴管加供試液0.1mL于上頜的黏膜面，3min后再以同法測試木屑從起始線移動到終點線所需時間3次，求其平均值，并與加藥前的結果比較，計算相對運動比。如給藥后木屑移行所需時間超過360s，按360s計。
相對運動比=（給藥前木屑移行所需平均時間/給藥后木屑移行所需平均時間）×100%
Tab.1EffectoftheDitongnasitisdroponthenasalmucociliamovement
與去氧膽酸鈉比較:*P<0.01（F檢驗）；給藥前后對照:#P<0.01（t檢驗）
滴通鼻炎水低、高劑量對蛙黏膜纖毛運動無明顯的影響，給藥前后纖毛運動的差異無顯著性。陽性對照藥1%去氧膽酸鈉能顯著抑制蛙黏膜纖毛運動。
2.2離體法研究滴通鼻炎水對蛙纖毛運動的影響［1］取10只蛙，同2.1法將蛙仰臥固定在蛙板上，使口腔張開，用手術剪分離上腭黏膜。取約3mm×3mm黏膜，生理鹽水洗凈血塊及雜物，黏膜面向上，平鋪于載玻片上。于黏膜表面滴加0.2mL藥液，輕輕蓋上蓋玻片，于40倍光學顯微鏡下觀察黏膜纖毛的運動情況，隨后擱置于加有少量蒸餾水的層析缸中，密閉。使水蒸氣近飽和狀態。實驗室環境溫度為25℃。此后每5min取出標本，顯微鏡觀察，如纖毛繼續運動，放回層析缸中，直至纖毛運動停止，記錄從給藥開始至纖毛運動停止所持續的時間。結果見表2。
以上試驗中，取自同一蛙上腭的黏膜分成4小塊，隨機分到各試驗組中，以減少試驗誤差。以給藥組的纖毛持續運動時間除以對照組（給生理鹽水）時間得纖毛持續運動時間（t）的相對百分率。百分率越接近100%，表示藥物對纖毛運動的影響越小。
Tab.2EffectoftheDitongnasitisdroponthenasalmucociliamovementinvitrofrogpalatemodel
與生理鹽水比較:*P<0.01(F檢驗);與1%去氧膽酸鈉組比較:#P<0.01(F檢驗)
表2說明，滴通鼻炎水低、高劑量組與生理鹽水組差異無顯著性，但這兩組與去氧膽酸鈉組比較差異均有顯著性。提示滴通鼻炎水對蛙黏膜纖毛運動無明顯影響，不像1%去氧膽酸鈉那樣有顯著抑制作用。
2.3半在體法研究滴通鼻炎水對蛙纖毛運動的影響［2,3］取40只蛙，隨機分成4組，即生理鹽水組、滴通鼻炎水低劑量組、滴通鼻炎水高劑量組、去氧膽酸鈉組。同2.1法將蛙仰臥固定在蛙板上，使口腔張開，于上腭黏膜處滴加供試液0.5mL使完全浸沒上腭，接觸30min后用生理鹽水洗凈藥物，分離上腭黏膜以供顯微鏡觀察纖毛運動情況。黏膜分離后立即洗凈，平鋪于載玻片上，于黏膜表面滴加生理鹽水，蓋上蓋玻片，參照2.2法（離體法）觀察并記錄纖毛運動的持續時間及恢復情況。并計算給藥組纖毛持續運動的相對百分率。結果見表3。
Tab.3EffectoftheDitongnasitisdroponthenasalmucociliamovementinsitufrogpalatemodel
與生理鹽水組比較:*P<0.01（F檢驗）；與1%去氧膽酸鈉組比較:#P<0.01（F檢驗）
表3數據表明：滴通鼻炎水低、高劑量組與生理鹽水組比較,纖毛運動持續時間差異有顯著性，且與去氧膽酸組比較差異均有顯著性。提示滴通鼻炎水對蛙纖毛運動有明顯抑制作用，但顯著弱于1%去氧膽酸鈉。
3討論
鼻腔表面襯以黏膜，黏膜表面是一層頂部長有纖毛的假復層柱狀上皮，內有分泌黏液的杯狀細胞，所分泌的黏液覆蓋在纖毛上。在正常情況下，纖毛協調一致地擺動,清除鼻腔內異物,具有清除作用。在病理狀態下,纖毛運動和黏液分泌受到影響,就很容易感染各種急慢性呼吸道疾病。正因為如此，近年來，關于滴鼻劑對黏膜纖毛的毒性評價越來越受到關注。對于滴鼻劑和噴霧劑等鼻腔給藥制劑,特別是需要較長時間用藥的,應研究其對鼻黏膜組織和黏膜纖毛的毒性，從而避免對鼻黏膜組織及黏膜纖毛產生毒性作用，妨礙鼻腔的正常生理功能,增加感染幾率。
滴通鼻炎水對蛙黏膜纖毛運動的研究表明：在整體動物實驗中，滴通鼻炎水低、高劑量（質量濃度分別為0.395g生藥/mL和1.58g生藥/mL）對蛙黏膜纖毛運動無明顯的影響(P>0.05)，提示無明顯纖毛毒性；在離體法研究滴通鼻炎水對蛙纖毛運動的影響實驗中，滴通鼻炎水亦無明顯毒性；用半在體法觀察滴通鼻炎水對蛙黏膜纖毛運動的影響實驗中，滴通鼻炎水對蛙纖毛運動持續時間有縮短作用，提示滴通鼻炎水較長時間（30min）浸潤于蛙黏膜纖毛后，可能對纖毛運動有抑制作用。在臨床用藥中，滴鼻或噴霧后，藥物難以長時間高濃度浸潤于鼻黏膜上，動物實驗與臨床實際用藥情況不盡相符，不可簡單套用于臨床，但可供臨床用藥參考。
從方法學來看，整體動物黏膜纖毛運動功能試驗最為可靠。離體法試驗由于黏膜離體后與實際用藥情況不符，可供參考。本文所說的半在體法，在一些文獻中稱為在體法，本法雖然在給藥期間，黏膜是在體的，但剖取口腔黏膜后，是離體的，因而只能算是半在體法。
綜合整個實驗，滴通鼻炎水對蛙黏膜纖毛運動無明顯影響，如長時間持續用藥要注意其對黏膜的抑制作用。
【參考文獻】
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