天然生物支架在軟骨修復中進展范文

本站小編為你精心準備了天然生物支架在軟骨修復中進展參考范文，愿這些范文能點燃您思維的火花，激發您的寫作靈感。歡迎深入閱讀并收藏。

【關鍵詞】軟骨修復

關節軟骨缺乏再生能力，外傷或疾病引起的軟骨缺損需利用軟骨或其它材料修復。自體軟骨來源有限，且容易造成供區缺損，應用受到限制。異體軟骨曾廣泛應用，但可引起免疫排斥反應，而導致細胞死亡及功能喪失。骨膜移植曾風行一時，但其存在遠期效果不穩定的缺陷，使得人們不斷探索更完善的修復方法。體外軟骨細胞培養成功，引發人們嘗試直接用軟骨細胞修復軟骨缺損。1968年，Chertman等將軟骨細胞懸液注射到關節軟骨缺損部位，結果表明：缺損為滑膜成纖維組織修復，鏡下僅見少量新生軟骨細胞結節。1977年，Green等以脫鈣骨作為支架，并接種上軟骨細胞，移植到缺損部位。雖未成功，可喜的是作者第一次提出：如能找到一種合適的支架材料，將軟骨細胞接種于其上，即有可能形成良好的軟骨組織修復。當前，在組織工程中開發為細胞培養支架的生物支架材料主要分為兩類，即天然生物支架材料和人工合成的支架材料。天然生物支架材料具有細胞信號識別，促進細胞的黏附、增殖和分化、良好的生物相容性及良好的生物降解性等優點，顯示出人工合成支架材料無可比擬的優勢。本文就天然生物支架材料在軟骨修復中的現狀和研究進展做如下綜述。

1天然脫細胞生物支架材料

天然脫細胞生物支架材料主要利用同種或異種器官／組織，經脫細胞、去除抗原處理得到脫細胞基質材料。細胞外基質(ECM)是由細胞自身分泌組成的并圍繞在細胞周圍主要含有膠原蛋白、纖維蛋白粘連素、層粘連蛋白，層連素等。細胞外基質不僅為細胞提供了一個支持結構和附著位點，而且對細胞的粘附、遷移、增殖、分化以及基因表達的調控有重要作用和顯著影響。目前已經有研究應用同種異體脫細胞材料修復膀胱、尿道、動脈和皮膚缺損［1～3］，以及構建心臟瓣膜［4］，結果比較滿意。另外關于脫細胞軟骨基質和小腸粘膜下基質(SIS)這2種天然的細胞外基質材料應用也有相關的研究報道［5～7］。

脫細胞基質材料具有多種天然細胞外成分，有利于細胞的吸附，增殖和分化并具有一定的力學強度，可作為組織填充物而長期存在；并且具有較好的組織親和性和相容性，可誘導軟骨細胞向其中生長而重建軟骨，在未來組織修復中它們將擁有廣泛的應用前景；但其脫細胞后的孔穴大小及孔穴間的連接縫隙的大小制約著種植細胞向深層發展。

2膠原支架材料

膠原是人體內含量最豐富的蛋白，占人體蛋白總量的30％以上，其中以細胞外基質中膠原蛋白含量最高。膠原蛋白在體內以膠原纖維的形式存在，其基本組成單位是原膠原分子，原膠原蛋白分子經多級聚合形成膠原纖維。膠原纖維與細胞外基質中其它成分形成結構與功能的復合體。膠原作為天然的生物材料，其本身無毒性，可被細胞酶類識別、標記、降解，有利于軟骨細胞黏附、增殖和分化，還可刺激移植組織產生新的膠原，并且降解產物可被機體吸收。

Wakitani等用Ⅰ型膠原凝膠與軟骨細胞或間充質干細胞混合后修復兔膝關節軟骨的全厚度缺損，取得較為滿意的結果［8,9］。Wambach等從狗甲狀軟骨上獲得的軟骨細胞種植到牛Ⅰ型膠原纖維上體外培養，結果發現甲狀軟骨細胞在Ⅰ型膠原基質中，通過產生Ⅱ型膠原，表達自身表型［10］。Stone等設計了一種用作半月板再生的膠原支架，經FDA批準后在10位病人身上作了初步的臨床實驗［11，12］。實驗結果表明，膠原支架是可移植的，而且在3a的植入期內是安全的，支架支持半月板缺損的組織再生，在連續的血清學測試中未發現不良的免疫反應。術后6個月通過關節鏡檢查發現新生成的軟骨組織替代了已被吸收的原植入物。Lee用Ⅱ型膠原作支架培養軟骨細胞，結果表明細胞生長和功能表達良好［13］。這些結果表明利用膠原材料作為基質支架開發組織工程化軟骨是可行的。

Ⅰ、Ⅱ型膠原由于含有特別的識別信號，有利于軟骨細胞粘附、增殖、分化，可作為良好的材料包埋添加劑。缺點是缺乏一定的機械強度，難于塑形，支架材料在體內降解過快，新生軟骨組織生化組成也難于評價。另外，由天然生物材料制備的膠原，每批產品之間，還存在著生化性質的差異。

3纖維蛋白支架材料

纖維蛋白凝膠在軟骨組織工程中的應用僅排在聚乳酸(polylacticacid，PLA)、聚羥基乙酸(PolyGlycolicAcid，PGA)和膠原材料之后。纖維蛋白與膠原一樣，本身就來自天然的細胞外基質，因此，也具有很好的生物相容性。纖維蛋白凝膠是纖維蛋白單體在凝血酶作用下聚合成的具有可塑形、可黏附性、可降解性及生物相容性的立體網狀結構凝膠，它可通過減慢凝血酶的聚集，因而減慢它從液態轉變為凝膠的過程，為凝膠的塑形提供充分的時間。纖維蛋白凝膠聚合時能釋放血小板衍生生長因子(PDGF)和轉化生長因子β(TGFβ)，有趨化性和致有絲分裂作用，能進一步促進細胞增殖、黏附和基質分泌。用這種凝膠包埋軟骨細胞，為細胞的生存提供了三維空間支持。纖維蛋白凝膠的大小和形狀能夠根據需要而塑形，為組織工程化軟骨提供了一種可選擇的聚合物支架。來源于自身血液制備的纖維蛋白凝膠，避免了免疫原性問題，可直接用于臨床，具有取材簡單、制備方便、韌性好等優點［14］。Hendrickson等將軟骨細胞-纖維蛋白原-軟骨-凝血酶混合物注入馬軟骨缺損區，1個月后形成類透明軟骨，內含大量的糖胺多糖和Ⅱ型膠原［15］。Silverman等將纖維蛋白與凝血酶混合產生纖維蛋白凝膠，再與豬軟骨細胞混合，注射到裸鼠皮下，在6、12周收集新形成的軟骨，通過組織學檢查及糖胺多糖、DNA和膠原Ⅱ含量分析，細胞濃度為40×104／ml時在6、12周形成固體軟骨，較對照組(僅注射軟骨細胞或纖維蛋白膠組)有顯著差異，因此認為，纖維蛋白膠對于可注射組織工程軟骨是一個合適的聚合物［16］。Meinhart的研究工作也支待上述觀點［17］。VanSusante等在羊的股骨髁制造全層軟骨缺損，然后將兔軟骨細胞和纖維蛋白膠原混懸液植于缺損處，研究顯示纖維蛋白凝膠作為三維支架材料不能提供足夠的生物機械支特［18］。Sims等利用血纖維蛋白單體聚合成凝膠用作基質支架，將濃度為12～15×106c

ell／ml的軟骨細胞―支架復合物植入裸鼠體內，術后12周發現有新的軟骨生成。作者還將人的肋骨軟骨細胞接種在纖維蛋白凝膠支架上，然后植入裸鼠皮下，也取得了很好的實驗結果［19］。

纖維蛋白膠可促進細胞的粘附、增殖和基質分泌，但作為三維支架材料它不能提供足夠的機械強度，這也是天然生物材料的共同缺點，再者它來自血液，大量獲取困難，但在非承重區的小范圍軟骨修復中仍不失為一種較好的支架材料。

4糖胺多糖

糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)是軟骨細胞增殖、分化的標志性產物。在體內GAG與蛋白質結合成為蛋白多糖(proteoglycan，PG)，構成細胞外的四大成分之一，可促進細胞的粘附、增殖、分化。人體內存在7種糖胺多糖：透明質酸(hyaluronicacid，HA)，4硫酸軟骨素(chondroitin4sulfate，CH4S)，6硫酸軟骨素(chondroitin6sulfate，CH6S)，硫酸皮膚素(demaransulfate，DS)，硫酸角質素(karatansulfate，KS)，肝素(heparin，HP)和硫酸肝素(heparansulfate，HS)。

Aigner等研究半合成可吸收物質透明質酸苯甲基硫(Hyaff11)在軟骨重建組織工程中人鼻中隔軟骨細胞培養的支架的可能性，研究證實Hyaff11無紡網支架在軟骨移植組織工程中有很好的發展前景［20］。Grigolo等用Hyaff11無紡網與軟骨細胞混合培養修復軟骨缺損，在第24周時，已有透明軟骨生成［21］。另外研究表明透明質酸及其衍生物支架有利于軟骨細胞的粘附、遷移、增殖與分化，并且促進其中生長的軟骨細胞合成和分泌細胞外基質［22,23］。這種糖胺多糖支架在自體軟骨細胞移植中具有一定潛力，在軟骨組織工程中有較好的應用前景。

5幾丁質

幾丁質是一種天然高分子有機多糖，亦稱甲殼質、甲殼素、殼聚糖。其化學名稱為β-(1，4)-2-乙酰氨基-2-脫氧-D-葡聚糖。這類天然多聚糖有明顯堿性，良好的生物相容性和生物可降解性。幾丁質所有降解產物對人體均無毒性、無刺激、無免疫原性、無致突變效應［24］。該材料具有廣譜的抑制細菌、霉菌的作用，能促進上皮細胞生長和創面愈合，且來源廣泛、價格便宜。Lahiji等在包被和未包被幾丁質的塑料蓋玻片上種植人軟骨細胞和成骨細胞，培養7d用熒光分子探針評價細胞活性，RT-PCR和免疫組織化學分析軟骨、成骨細胞的表型表達。幾丁質包被的細胞在玻片上成骨和軟骨細胞表現為圓形和折光性。相反在塑料玻片上90％的細胞變長或呈紡錘形。RT-PCR和免疫染色證實在幾丁質上成骨細胞表達I型膠原、軟骨細胞表達Ⅱ型膠原［25］。在體外研究證實，具有生物相容性的幾丁質作為基質材料可促進成骨和軟骨細胞生長并保持其功能，幾丁質作為組織工程支架材料，具有修復骨和軟骨缺損的潛能。

6藻酸鹽

藻酸是從海藻中分離出來的一類多糖聚合物。藻酸鈣水凝膠可保持較好的形狀，并且藻酸鈣無毒性，在組織培養中用于細胞培養載體。Paige等采用藻酸鈣水凝膠復合牛肩關節軟骨細胞做成圓盤狀移植物，移植于裸鼠背部皮下，8、12周后形成新鮮軟骨［26］。Fragonas等研究了藻酸鹽凝膠混合同種異體軟骨細胞，體內修復全層損傷的兔關節軟骨，4～6個月后，軟骨細胞移植物完全修復缺損，并恢復到正常組織結構［27］。藻酸鹽水凝膠與其他聚合物相比，價格低、來源豐富、易塑形、具有更好的親水性，易于細胞吸附，營養物質易于滲透等特點；它本身不是軟骨細胞外基質的天然成分，與PLA、PGA等特定形狀聚合物材料相比，藻酸鈣水凝膠具有親水性好、營養物質易于滲透、可預先制成各種形狀、能為細胞提供良好的三維生長環境并能保持良好形態等優點。藻酸鈣水凝膠在生物體內以酶解方式生成甘露糖醛酸和葡萄糖醛酸單體，對機體無毒性、無免疫原性［28］。但藻酸鈣也存在組成成分不穩定，不同成品純度不一，藻酸鈣的純度不夠會導致一定程度的免疫原性和較差的可吸收性。

7蠶絲蛋白

蠶絲蛋白直接來源于蠶的腺體蛋白，經分離和鑒定，它是一種多肽，Inoue等研究發現，家蠶分泌的絲蛋白包括一個重鏈，一個輕鏈和一個精蛋白P25，重鏈和輕鏈由二硫鍵連接，P25以二硫化合物通過非共價鍵形式結合。蠶絲蛋白定量酶聯免疫吸附試驗顯示，重鏈、輕鏈、P25的克分子比為6：6：1［29］。Inouye等檢測了動物貼壁細胞在蠶絲蛋白、膠原、聚苯乙烯3種材料包被的培養皿中生長情況，發現蠶絲蛋白和膠原蛋白包被的培養皿，細胞生長情況基本一致，均較在聚苯乙烯包被的培養皿中生長的細胞高出30％～50%［30］。Santin等評價蠶絲纖維膜的炎癥反應，并與2種物理-化學性質完全不同的物質聚苯乙烯、2-羥乙基一甲基丙烯酸酚作對比，蠶絲膜引起的炎性反應要少于高分子材料［31］。天然材料本身包含很多生物信息，能夠使細胞更容易附著，并促進細胞的分化、增殖，保持細胞的表型，但天然材料在生產、加工過程中，質量難以控制，性能發生變化。蠶絲已是天然成品可避免其它天然生物材料需進一步加工形成的缺點。蠶絲具有良好的表面活性和很好的組織相容性。所以蠶絲是軟骨細胞立體培養的良好天然支架，其來源豐富，價格便宜處理簡單，在軟骨組織工程領域中將有廣泛的應用前景。

8復合天然聚合物支架材料

體內細胞生長的基質非常復雜，單一材料較難適應細胞培養的要求，通過共混調整不同材料之間的比例，使共混材料具有更適合細胞培養的力學性能、降解性和生物學性質等。天然可降解生物材料既可以與天然的生物材料共混，也可以與人工合成的生物材料共混。Yamane等用幾丁質和硫酸軟骨素混合制得水凝膠，在其中接種關節軟骨細胞，發現細胞能很好地貼附于材料上，并且細胞能保持一些軟骨細胞特殊的表型，如細胞呈圓形，存在有限的有絲分裂，能生成Ⅱ型膠原及蛋白聚糖等。這些結果證實硫酸軟骨素-幾丁質可能是一種很好的自體軟骨移植載體材料或用于組織工程中類軟骨組織的骨架［32］。透明質酸

與藻酸鹽、膠原蛋白或者幾丁質混合包埋，將會對軟骨細胞的吸附、增殖、分化產生更好的促進作用，最終導致特異性軟骨基質形成［33］。天然高分子生物材料還可作為高分子聚合物的包埋劑以增強高分子材料的親水性及對細胞的粘附、增殖、分化作用［34］。

9天然生物支架材料存在的問題和展望

理想的軟骨組織工程支架材料應具有以下特性：（1）具有良好的生物相容性。在體外培養時無細胞毒性，植入體內，無論其本身或其降解產物都應對機體無毒性，都不會導致機體炎癥反應和引起宿主的移植排斥反應；（2）具有三維立體結構。必須是高度多孔的類似泡沫狀，孔隙率應達到90％以上，并具有很大的內表面積，這樣既有利于細胞的植入、粘附，又有利于細胞營養成分的滲入和代謝產物的排出；（3）具有良好的表面活性。應能夠促進軟骨組織粘附和增殖，并且能很好維持和促進軟骨細胞的表型表達；（4）具有生物可降解性和降解率。支架在組織形成過程中應逐漸被降解，并且不影響新生成組織的結構和功能。材料支架的降解速率必須與種植入的細胞組織形成的速率相匹配，當材料支架完成為組織再生提供模板的功能后，可被完全地降解吸收掉；（5）具有可塑性。可被加工成所需要的形狀并具有一定的機械強度，在植入體內后的一定時間內仍可保持其形狀，并使新形成的組織具有符合設計的外形。

天然生物支架材料來源于生物體本身，具有組織相容性較好，毒性較小，易降解，且降解產物易被人體吸收而不產生炎癥反應等優點，所以在組織工程中作為細胞培養的支架材料具有人工合成材料所不可比擬的優勢。但天然生物材料也存在一些需要解決的問題：(1)天然可降解的生物材料每批產品的質量都不一樣，故其產品質量比較難控制。天然高分子材料在力學性能及降解速度、通透性等方面存在矛盾，即高分子量通常有高強度，但是它的降解速度和通透性就難以滿足組織工程中細胞培養支架的要求。因此需要統一材料的質量標準，嚴格控制其質量，加強材料的性質和結構等基礎理論的研究；(2)共混生物材料的研究開發，可以取長補短，來滿足組織工程中不同組織的要求，生產出具有合適降解速度、良好通透性、弱免疫原性的細胞培養支架材料，所以應加強對共混膜的性質及制備方法的研究；(3)對現有天然生物材料，包括其衍生物也有待于進一步的研究開發，如對幾丁質和透明質酸進行化學修飾，產生多種衍生物，使其更適合作為細胞培養的支架材料；(4)天然可降解生物材料與細胞之間的粘附問題也有待于進一步的研究，選擇有利于細胞粘附的材料，同時可以對作為細胞培養支架材料進行表面修飾。

總之，當前軟骨組織工程支架材料研究重點是改進現有材料和制備工藝，并探索新材料和新的制備方法。在改進材料的基礎上，將生長因子與支架復合或配以更合理的工程化細胞培養體系以提高軟骨質量，并由動物實驗逐步向臨床應用過渡將是今后研究的方向，并將推動軟組織工程研究向成熟階段邁進。

參考文獻：

［1］SchanerPJ,MartinND,TulenkoTN,etal.Decellularizedveinasapotentialscaffoldforvasculartissueengineering［J］.JVascSurg.2004，40(1):146-153.

［2］NgKW,KhorHL,HutmacherDW.Invitrocharacterizationofnaturalandsyntheticdermalmatricesculturedwithhumandermalfibroblasts［J］.Biomaterials,2004,25(14):2807-2818.

［3］JemiganTW,CroceMA,CagiannosC,etal.Smallintestinalsubmucosaforvascularreconstructioninthepresenceofgastrointestinalcontamination［J］.AnnSurg，2004，239(5):733-740.

［4］CebotariS,MertschingH,KallenbachK,etal.Constructionofautologoushumanheartvalvesbasedonanacellularallograftmatrix［J］.Circulation.2002,24;106(12Suppl1):163-168.

［5］LiF,LiW,JohnsonS,etal.Lowmolecularweightpeptidesderivedfromextraceularmatrixaschemoattractantsforprimaryendothelialcells［J］.Endothelium,2004,11(3-4):199-206.

［6］FoxDB,CookJL,ArnoczkySP,etal.Fibrochondrogenesisoffreeintraarticularsmallintestinalsubmucosascaffolds［J］.TissueEng，2004,10(1-2):129-137.

［7］ZhangF,ZhuC,OswaldT,etal.Porcinesmallintestinalsubmucosaasacarrierforskinflapprefabrication［J］.AnnPlastSurg,2003,51(5):488-492.

&n

bsp;［8］WakitaniS,GotoT,YoungRG,etal.Repairoflargefullthicknessarticularcartilagedefectswithallograftarticularchondrocytesembeddedinacollagengel［J］.TissueEng,1998,4(4):429-444.

［9］WakitaniS,GotoT,PinedaSJ,etal.Mesenchymalcellbasedrepairoflarge,fullthicknessdefectsofarticularcartilage［J］.JBoneJointSurg(Am),1994,76(4):579-592.

［10］WambachBA,CheungH,JosephsonGD.CartilagetissueengineeringusingthyroidchondrocytesonatypeIcollagenmatrix［J］.Laryngoscope,2000,110(12):2008-2011.

［11］StoneKR,SteadmanJR,RodkeyWG,etal.Regenerationofmeniscalcartilagewithuseofacollagenscaffold.Analysisofpreliminarydata［J］.JBoneJointSurg(Am),1997,79(12):1770-1777.

［12］StoneKR,RodkeyWG,WebberR,etal.Meniscalregenerationwithcopolymericcollagenscaffolds.Invitroandinvivostudiesevaluatedclinically,histologically,andbiochemically［J］.AmJSportsMed,1992,20(2):104-111.

［13］LeeCR,GrodzinskyAJ,SpectorM.BiosyntheticresponseofpassagedchondrocytesinatypeⅡcollagenscaffoldtomechanicalcompression［J］.JBiomedMaterResA,2003,64(3):560-569.

［14］PerettiGM,RandolphMA,ZaporojanV,etal.Abiomechanicalanalysisofanengineeredcellscaffoldimplantforcartilagerepair［J］.AnnPlastSurg,2001,46(5):533-537.

［15］HendricksonDA,NixonAJ,GrandeDA,etal.Chondrocytefibrinmatrixtransplantsforresurfacingextensivearticularcartilagedefects［J］.JOrthopRes,1994,12(4):485-497.

［16］SilvermanRP,PassarettiD,HuangW,etal.Injecbrtissueengineeredcartilageusingafibringluepolymer［J］.PlastReconstrSurg,1999,103(7):1809-1818.

［17］MeinhartJ,FusseneggerM,HoblingW.Stabilizationoffibrinchondrocyteconstructsforcartilagereconstruction［J］.AnnPlastSurg,1999,42(6):673-678.

［18］VanSusanteJL,BumaP,HommingaGN,etal.Chondrocyteseededhydroxyapatiteforrepairoflargearticularcartilagedefects［J］.Apilotstudyinthegoat.Biomaterials，1998,19(24):2367-2374.

［19］SimsCD,ButlerPE,CaoYL,etal.Tissueengineeredneocartilageusingplasmaderivedpolymersubstratesandchondrocytes［J］.PlastReconstrSurg,1998,101(6):1580-1585.

［20］AignerJ,TegelerJ,HutzlerP,etal.Cartilagetissueengineeringwithnovelnonwovenstructuredbiomaterialbasedonhyaluronicacidbenzylester［J］.JBiomedMaterRes,1998,42(2):172-181.

［21］GrigoloB,RosetiL,FioriniM,etal.Transplantationofchondrocytesseededonahyaluronanderivative(hyaffo11)intocartilagedefectsinrabbits［J］.Biomaterials,2001,22(17):2417-2424.

［22］YooHS,LeeEA,YoonJJ,etal.Hyaluronicacidmodifiedbiodegradable

scaffoldsforcartilagetissueengineering［J］.Biomaterials,2005,26(14):1925-1933.

［23］NettlesDL,VailTP,MorganMT,etal.Photocrosslinkablehyaluronanasascaffoldforarticularcartilagerepair［J］.AnnBiomedEng,2004,32(3):391-397.

［24］NettlesDL,ElderSH,GilbertJA.Potentialuseofchitosanasacellscaffoldmaterialforcartilagetissueengineering［J］.TissueEng,2002,8(6):1009-1016.

［25］LahijiA,SohrabiA,HungerfordDS,etal.Chitosansupportstheexpressionofextracellularmatrixproteinsinhumanosteoblastsandchondrocytes［J］.JBiomedMaterRes,2000,15;51(4):586-495.

［26］PaigeKT,CimaLG,YaremchukMJ,etal.Denovocartilagegenerationusingcalciumalginatechondrocyteconstructs［J］.PlastReconstrSurg,1996,97(1):168-178;179-180.

［27］FragonasE,ValenteM,PozziMucelliM,etal.Articularcartilagerepairinrabbitsbyusingsuspensionsofallogenicchondrocytesinalginate［J］.Biomaterials,2000,21(8):795-801.

［28］CatersonEJ,LiWJ,NestiLJ,etal.Polymer/alginateamalgamforcartilagetissueengineering［J］.AnnNYAcadSci,2002,961:134-138.

［29］InoueS,TanakaK,ArisakaF,etal.SilkfibroinofBombyxmoriissecreted,assemblingahighmolecularmasselementaryunitconsistingofHchain,Lchain,andP25,witha6:6:1molarratio［J］.JBiolChem,2000,22;275(51):40517-40528.

［30］InouyeK,KurokawaM,NishikawaS,etal.UseofBombyxmorisilkfibroinasasubstratumforcultivationofanimalcells［J］.JBiochemBiophysMethods,1998,18;37(3):159-164.

［31］SantinM,MottaA,FreddiG,etal.Invitroevaluationoftheinflammatorypotentialofthesilkfibroin［J］.JBiomedMaterRes,1999,5;46(3):382-389.

［32］YamaneS,IwasakiN,MajimaT,etal.Feasibilityofchitosanbasedhyaluronicacidhybridbiomaterialforanovelscaffoldincartilagetissueengineering［J］.Biomaterials,2005,26(6):611-619.

［33］HsuSH,WhuSW,HsiehSC,etal.EvaluationofchitosanalginatehyaluronatecomplexesmodifiedbyanRGDcontainingproteinastissueengineeringscaffoldsforcartilageregeneration［J］.ArtifOrgans,2004,28(8):693-703.

［34］YooHS,LeeEA,YoonJJ,etal.Hyaluronicacidmodifiedbiodegradablescaffoldsforcartilagetissueengineering［J］.Biomaterials,2005,26(14):1925-1933.新晨