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摘要hplc法測定寧夏產四種柴胡中木脂素類成分(kaerophyllin)的含量,用甲醇提取后進樣。色譜條件:ODS-C18柱(150mm×6mm),流動相為甲醇-水(70∶30),測定波長328nm。結果表明寧夏產小葉黑柴胡、短莖柴胡、空心柴胡、秦嶺柴胡中均含有kaerophyllin。
關鍵詞:HPLC法;kaerophyllin;寧夏產柴胡
我國有20余種柴胡屬植物供藥用,寧夏有10種〔1〕均含有柴胡皂苷a.d。小葉黑柴胡中有較高含量的木脂素類成分,是區別于北柴胡的顯著特點〔2〕。為系統地考察柴胡的質量,筆者對寧夏產四種柴胡中Kaerophyllin進行了含量測定。
1儀器與試藥
1.1儀器LC-6A高效液相色譜儀(日本)。
1.2試藥Kaerophyllin(日本東邦大學藥學部分離,經UV,IR,MS,1H-NMR,13C-NMR鑒定);柴胡〔采集于寧夏固原縣,寧夏藥品檢驗所邢世瑞主任藥師鑒定為:北柴胡(B.chinenseDC),小葉黑柴胡(B.smithiiwolffvar.parvifoliumShanetY.Li),短莖柴胡(B.pusillumKrylov),空心柴胡(B.longicaulevar.francheliiBoiss),秦嶺柴胡(B.longicaulevar.giraldiiwolff)〕。
2方法與結果
2.1色譜條件色譜柱ShimpackCLC-ODS-C18(150mm×6mm),流動相:甲醇-水(70∶30),流速1ml/min,進樣量15μl,檢測波長328nm。
2.2標準曲線精密稱取Kaerophyllin5mg,用甲醇溶解定容于10ml量瓶中,制成標準溶液;精密吸取2,6,10,14,18μl注入高效液相色譜儀,以進樣量對峰高回歸得方程為Y=0.065+0.346C(r=0.9961),線性范圍為1~9μg。
2.3回收率試驗精密稱取北柴胡粉末0.5g,加入Kaerophyllin1.0260mg,用甲醇25ml40℃溫浸20min后,超聲提取30min,過濾;重復兩次,揮去甲醇,再用甲醇4ml溶解后;過濾,置5ml量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,微孔濾膜過濾(0.45μm);取濾液進樣15μl,計算回收率為97.1%,RSD=2.1%(n=5)。
2.4樣品含量測定精密稱取4種柴胡粉末各0.5g。用甲醇25ml40℃溫浸20min后,按上述條件進行樣品制備和含量測定,結果見圖1、表1。
3小結
寧夏產小葉黑柴胡、短莖柴胡、秦嶺柴胡、空心柴胡均含有Kaerophyllin,且含量較高,北柴胡中只有痕量。該實驗對綜合評價柴胡的質量具有參考價值。
表1各柴胡中Kaerophyllin的含量(n=5)
藥材Kaerophyllin(%)北柴胡痕量小葉黑柴胡0.53短莖柴胡0.76秦嶺柴胡0.39空心柴胡0.21
A-kaerophyllinB-小葉黑柴胡C-短莖柴胡
D-空心柴胡E-秦嶺柴胡
參考文獻
〔1〕邢世瑞主編.寧夏中藥資源.銀川:寧夏人民出版社,1987:47
〔2〕尚明遠,袁本香,王英華,等.HPLC法測定寧夏產柴胡中柴胡皂苷a.d的含量.西北藥學雜志,1998,13(4):153
〔3〕王英華,尚明遠,邢世瑞,等.小葉黑柴胡化學成分比較研究簡報.寧夏醫學雜志,1996,18(增刊):9新晨