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《中國藥典》2005版收載川木通為毛茛科植物小木通ClematisarmandiiFranch.或繡球藤ClematismontanaBuch.-Ham.的干燥藤莖。川木通具有清熱利尿、通經下乳之功效，主治水腫、小便不利與經閉乳少等癥，是常用中藥材［1］。《中國藥典》規定以齊墩果酸作為川木通薄層鑒別的特征性成分。在我們以往的研究中，按《中國藥典》方法實驗，結果表明9批川木通均不含此成分，但在薄層色譜上顯示出一紫紅色共同斑點［2］。經過成分分離、鑒定，從小木通的莖中分離得到4個化合物，其結構分別鑒定為9,12-Octadecadienoicacid(z.z)-2,3-dihydroxypropylester、麥角甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇，并用TLC圖譜比對分析證明上述薄層色譜上顯示的紫紅色共同斑點為麥角甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇的混合物。通過HPLC和TLC比對，采集的9批不同產地小木通和一批繡球藤中也含有豆甾醇。為控制川木通藥材質量，筆者建立了HPLC法測定川木通中豆甾醇的含量。
1儀器與試藥
高效液相色譜儀：島津LC-10ATvp高效液相儀，SPD-10Avp紫外檢測器，HW-2000色譜工作站；SartoriusBP211D電子分析天平（德國塞多利斯），JA2002N電子分析天平。
對照品：豆甾醇（實驗室自制，mp、UV、IR、EI-MS、13C-NMR等數據與文獻值一致［3］，含量99.8％）；小木通、繡球藤藥材采集自四川省崇州市、重慶南川，四川汶川、彭州、洪雅、天全、都江堰、峨眉和康定等地，由四川省中藥研究所生藥室方清茂副研究員鑒定；甲醇為色譜純，水為二次重蒸水。
2方法與結果
2.1色譜條件色譜柱為DiamonsilC18柱（4.6mm×150mm，5μm，迪馬公司）；流動相為甲醇-水（97∶3）；檢測波長為210nm；流速1.0ml·min-1；柱溫30℃；進樣量5μl；分離度大于1.5。見圖1～2。
圖1豆甾醇的HPLC圖（略）
圖2川木通樣品的HPLC圖（略）
2.2對照品溶液的制備取豆甾醇對照品適量，精密稱定，置1ml量瓶中，加甲醇-氯仿（1∶1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液（1.835mg·L-1）。
2.3供試品溶液的制備取川木通生藥約2g，精密稱定重量，用20ml氯仿回流提取2次，1h/次，放冷，濾過，合并濾液，蒸干，殘渣用甲醇-氯仿（1∶1）溶解并稀釋成1ml，搖勻，即得。
2.4線性關系實驗取對照品溶液，按上述色譜條件分別進樣1，3，5，7，10μl，以峰面積為縱坐標（Y），以對照品進樣量為橫坐標（X），得回歸曲線方程：Y=39476X+26684，r=0.9999。結果表明豆甾醇進樣量在1.835～18.35μg范圍內與峰面積積分值具有良好的線性關系。
2.5精密度實驗取同一批號供試品，按“2.3”法制備供試品溶液。按上述色譜條件連續進樣5次，測得峰面積RSD=0.3%，(n=5)。
2.6重復性實驗按樣品測定方法，對同一批川木通藥材進行5次平行實驗，計算其平均含量為0.27mg·g-1，RSD=0.6%。
2.7穩定性實驗取同一批號供試品，按“2.3”項下法制備供試品溶液，每2h進樣1次，重復5次，RSD=0.7%，說明供試品在8h內穩定性良好。
2.8加樣回收率實驗稱3份同一批號已知含量的供試品2g，分別加入0.4，0.5，0.6ml濃度為1.944mg·ml-1的對照品溶液配成低，中，高3個濃度進行實驗測定，平行測定3次，測得平均回收率分別為101.1%，101.0％，103.6％，RSD分別為1.3％，2.1％，0.7％。
2.9樣品測定取不同產地供試品各3份，按“2.3”項下法制備供試品溶液。照上述色譜條件分別進樣，測定。結果見表1。
表1川木通中豆甾醇的含量測定結果（略）
3討論
本實驗分別采用不同比例甲醇-水（95∶5，96∶4，97∶3）為流動相實驗，結果表明以甲醇-水（97∶3）為流動相時豆甾醇的峰形和出峰時間最佳。此條件下，方法的可靠性高，準確性和重復性好，適用于川木通藥材中豆甾醇的含量測定。