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1儀器與試藥
LC??20A高效液相色譜儀，可變紫外檢測器(日本島津)。
甘草苷對照品（由中國藥品生物制品檢定所提供，批號：111610??200503）；止嗽丸為實驗室樣品；甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。
2方法與結果
2.1色譜條件
色譜柱:HypersilC18柱(5μm;4.0mm×250mm):流動相:乙腈??0.5％冰醋酸（體積比20∶80）；流速1.1mL/min；檢測波長276nm；柱溫30℃；進樣量:10μL。
2.2對照品溶液的制備
取甘草苷對照品適量，加體積分數70％乙醇制成每1mL含20μg的溶液，即得。
2.3供試品溶液的制備
取本品粉末約1g，置具塞錐形瓶中，精密加入體積分數70％乙醇100mL，稱定重量，超聲處理30min，取出，再稱定重量，用體積分數70％乙醇補足減失的重量，濾過，即得。
2.4方法的專屬性考察
在上述的色譜條件下，將甘草苷對照品溶液、供試品溶液、甘草陰性對照溶液注入液相色譜儀中，得HPLC圖（見圖1），結果顯示陰性對照無干擾。
A.甘草苷對照品;B.止嗽丸樣品;C.甘草陰性對照
圖1HPLC圖譜（略）
Figure1HPLCchromatograms
2.5線性關系的考察
精密稱取甘草苷對照品適量，加流動相制成每1mL分別含甘草苷2.001、4.002、10.00、20.01、40.02、200.1μg的溶液，分別吸取10μL進樣測定峰面積。以峰面積為縱坐標，對照品的質量濃度為橫坐標，繪制標準曲線，計算得回歸方程:y=29543x+144.52，r=1.000。表明甘草苷進樣量在0.020～2.001μg范圍內與峰面積呈良好的線形關系。
論文百事通
2.6精密度試驗
分別取對照品溶液10μL，連續進樣5次，測定峰面積，計算得甘草苷的峰面積RSD分別為0.4%。
2.7重復性試驗
精密稱取同一批號樣品，按供試品溶液制備方法平行制備5份，依法測定，計算甘草苷含量RSD值為0.6%。
2.8穩定性試驗
取同一供試品溶液，于0、2、3、4、6、8、11、24h進樣測定，計算得甘草苷的峰面積的RSD為1.0%,表明樣品溶液在24h內穩定。
2.9加樣回收率試驗
分別精密稱取已知含量（含量為1.312mg/g）的本品適量6份，分別精密加入甘草苷對照品溶液（0.2001mg/mL）各3mL，按”2.3”項下方法制得供試品溶液。分別吸取上述供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測定其中甘草苷的總量，與止嗽丸中應含有的甘草苷總量進行比較，計算回收率，結果見表1。
表1甘草苷回收率試驗測定結果（略）
br1Resultsofrecoverytest
2.10樣品測定
分別精密稱取不同批號的止嗽丸適量，按“2.3”項下方法制備溶液，按“2.1”項下色譜條件進行HPLC分析，結果3個批號的樣品所測得的平均含量為1.312、1.323、1.298mg/g。
3討論
甘草中的黃酮類成分具有抗氧化、抗病毒、抗炎、抗潰瘍作用［1］。甘草苷是甘草的黃酮類成分之一，也是止嗽丸治療疾病的活性成分，故選擇甘草苷作為該制劑的定量指標。
通過參考文獻［2-5］并進行實驗，選用乙腈??0.5％醋酸(體積比1∶4)為流動相，能很好地將甘草樣品中的甘草苷分離出來。
甘草苷可溶于乙醇、甲醇和水等溶劑，但因溶劑極性的不同，其溶解度也不同，參考《中國藥典》2005年版一部甘草項下甘草苷的提取方法，選用體積分數70％乙醇作為提取溶劑［2］，提取效率高。另外，對照品及陰性對照的制備同樣采用體積分數70％乙醇為溶劑，確保與供試品平行一致，且該溶劑低毒環保。新晨
本法簡便、快速、專屬性強、重現性好，可作為止咳丸的質量控制方法。
【參考文獻】
［1］賈國惠，賈世山．甘草中黃酮的藥理作用研究進展［J］．中國藥學雜志，1998，33(9)：513-514.
［2］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：2005年版一部［M］.北京：化學工業出版社，2005：60.
［3］李仁秋.高效液相色譜法測定新止咳合劑中甘草苷的含量［J］.云南中醫中藥雜志，2008，29（2）：35-36.
［4］閆永紅，王文全，楊娜.HPLC測定栽培甘草中甘草苷的含量［J］.中國中藥雜志，2006，31（11）：926-927.
［5］伍蔚萍，閻宏濤，孫文基.HPLC法測定甘草中甘草苷的含量［J］.藥物分析雜志，2004，24(4)：425-427