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《食品科技雜志》2014年第八期
1方法與材料
1.1抗疲勞功能實驗
[3]1.1.1小鼠負重游泳實驗以自身體重5%的鉛皮捆綁于小鼠尾根,置25℃水中游泳,記錄小鼠開始游泳至死亡時間。若劑量組小鼠游泳時間顯著長于對照組,則可認為該樣品可以增強小鼠負重游泳能力。
1.1.2小鼠血清尿素氮的測定置小鼠于30℃水中自由游泳90min。游畢休息60min后自眼內眥采血,測定血清尿素氮值。若劑量組尿素氮含量顯著低于對照組,則可認為該樣品可以減少疲勞小鼠體內尿素的產生。
1.1.3小鼠肝糖原的測定以安死術處死小鼠后,取肝臟0.1g,加入8mL5%三氯乙酸,用組織勻漿機制成勻漿后以3000r/min速度離心15min,取上清液測定肝糖原含量(蒽酮法)。若劑量組肝糖原含量顯著高于對照組,則可判定該樣品可以增加小鼠肝糖原儲備。
1.1.4小鼠血乳酸測定置小鼠于30℃水中自由游泳10min,分別在游泳前、游泳后即時及休息20min后采血進行乳酸測定。小鼠血乳酸曲線下面積計算方法為:小鼠血乳酸曲線下面積=5×(游泳前血乳酸含量值+3×游泳后0min的血乳酸含量值+2×游泳后休息20min的血乳酸含量值)若劑量組血乳酸曲線下面積顯著小于對照組,則可判定該樣品可以減少小鼠運動后的血乳酸堆積。
1.2耐缺氧功能實驗[3]
1.2.1常壓耐缺氧實驗準備40只250mL磨口瓶,各加入5g鈉石灰,將小鼠放入瓶中(每瓶1只),用瓶塞和凡士林密封瓶口,記錄小鼠存活時間。若劑量組小鼠存活時間顯著大于對照組,則可判斷為受試樣品可以增加小鼠常壓下的缺氧存活時間。
1.2.2亞硝酸鈉中毒存活實驗以2.4mg/10gBW用量給小鼠腹腔注射NaNO2(0.1mL/10gBW•ip),注射完畢開始計時,記錄小鼠注射后存活時間。若劑量組小鼠的存活時間顯著大于對照組,則可認為受試樣品可以延長小鼠亞硝酸鈉中毒后的存活時間。
1.2.3急性腦缺血性缺氧實驗將小鼠自頸部快速斷頭,記錄小鼠自斷頭至張口呼吸停止的時間。若劑量組小鼠的呼吸時間顯著長于對照組,則判定該樣品可以在急性缺氧的狀態下延長小鼠的存活時間。
1.3實驗數據統計用SPSS13.0軟件對實驗數據進行分析比較。先用單因素方差分析法對各組數據進行總體差異的檢驗,再用Dunnett法進行各劑量組與對照組之間的兩兩比較。
2結果
2.1抗疲勞實驗結果由表1可見,劑量組小鼠的負重游泳時間均大于對照組,且差異均有統計學意義(P<0.01或P<0.05)。高、中劑量組的血乳酸及全部劑量組的尿素水平均顯著低于對照組,差異有統計學意義(P<0.01或P<0.05)。而各組肝糖原含量之間無顯著差異(P>0.05)。
2.2耐缺氧實驗結果由表2可見,高、中劑量組的斷頭呼吸時間及全部劑量組的缺氧存活時間均顯著大于對照組,差異有統計學意義(P<0.01或P<0.05)。各組小鼠在亞砷酸鈉中毒后的存活時間相比較,結果無顯著差異(P>0.05)。
3討論
紅景天藥用歷史久遠,早在公元8世紀在國唐代就已成為藏醫的常用藥。首載紅景天的藏醫藥著作是《四部典醫》,明代李時珍《本草綱目》記載“紅景天,本經上品,祛邪惡氣,補諸不足”是“已知補益藥中所罕見”,主要功效是扶正固本,補氣養血,清熱潤肺。由于紅景天性味平和,即使常年服用,也不會出現口干、唇燥等副作用,因此,紅景天已被廣泛地用于治療高原病、心腦血管疾病等,我國和前蘇聯等有紅景天資源的國家,還把它加工為保健品,專供飛行員、運動員、宇航員、潛涵作業員等特殊崗位者,取得了很好的效果。近年來,紅景天制品逐漸走入百姓市場,因其對腦力和體力的雙重緩解效果良好,越來越受到城市上班族的青睞。機體(包括腦部)的持續運動能力,取決于體內能源物質的儲備量及供氧是否充足。在有氧狀態下,機體先動用糖原為能源物質,糖原耗盡后,機體會動用蛋白質供能,此時機體內就會產生蛋白質的代謝物——尿素,所以機體內糖原和尿素含量均可以作為機體運動能力和疲勞水平的間接反映。在缺氧環境下,機體依然以糖原作為能源物質,所不同的是,此時的糖代謝過程是無氧酵解,無氧酵解不僅產生的能量非常少,而且其產物乳酸是導致機體疲勞感的直接因子,故而我們可以通過運動后機體的乳酸含量來判斷機體對氧的攝取和利用能力。本研究各實驗結果表明,紅景天可以提高小鼠的運動耐力,減少運動后體內的尿素含量和乳酸堆積,對肝糖原的儲備量無明顯作用。綜合實驗結果說明紅景天具有緩解體力疲勞的能力。
即使環境中氧充足,如果機體的運動量過大或持續時間過長,由于心肺能力的瓶頸,體內的肌肉和神經組織仍然會缺氧。如果機體對氧的攝取、運輸和利用能力強,就能產生更多的能量,同時減少無氧酵解產生的乳酸,延緩疲勞的出現,所以機體對缺氧的耐受力直接影響到疲勞出現的時間先后。研究結果表明,紅景天可以增加小鼠在缺氧狀態下的存活時間和急性腦缺血缺氧狀態下的呼吸時間,說明該受試樣品能增強小鼠耐缺氧的能力。實驗結果還提示我們,紅景天增強機體缺氧耐受力的機制可能與改善心肺功能有關,其抗疲勞機制或一致。亞硝酸鈉的毒性機理是阻斷細胞呼吸鏈,紅景天中的功效因子可能無法拮抗這一中毒作用,故各劑量組的實驗結果與對照組結果相近,說明紅景天不能降低亞硝酸鈉的毒作用。
對于紅景天功效的細胞分子機制,國內學者也進行了一定的研究,目前普遍認為,紅景天的主要功效成分為紅景天苷和黃酮,其作用機制涉及清除自由基、增加抗氧化酶活性、激活細胞內與能量代謝相關的Ca2+-Mg2+—ATP酶、保護低氧狀態下的心肌細胞等多個方面。紅景天不僅具有多方面的藥理作用,而且得益于其藥食同源的天然優勢,長期服用安全無副作用,近年來隨著種植學科的發展,紅景天已經實現了人工栽培,相信紅景天在職業疲勞人群和老年人群中將會有廣闊的市場前景。
作者:李彬彭亮張潔宏傅偉忠王彥武黃超培單位:廣西自治區疾病預防控制中心