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    天麻的形態組織學對比分析范文

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    天麻的形態組織學對比分析

    《華西藥學雜志》2016年第一期

    摘要:

    目的對比研究天麻形態組織學,尋找不同品種天麻的鑒別依據。方法采用生藥學常規方法,對不同品種天麻進行原植物、藥材性狀、顯微特征的對比觀察,并觀察花粉塊的掃描電鏡特征。結果找出了烏天麻、紅天麻、綠天麻在形態組織學方面的鑒別特征。結論為天麻的品種鑒別提供了參考依據。

    關鍵詞:

    天麻;原植物;藥材性狀;顯微鑒別;電鏡掃描

    天麻GastrodiaelataBl.為蘭科天麻屬多年生寄生植物,以干燥塊莖入藥,具有息風止痙、平抑肝陽、祛風通絡之功效。用于治療失眠、頭痛、耳鳴、肢體麻木、高血壓等癥。此外,天麻還用于食品、保健品、美容化妝品等,國內外市場需求量大,在中國陜西、云南、貴州、四川、湖北等省均有種植。中國的天麻有紅天麻、烏天麻、綠天麻、黃天麻和松天麻等5個變型[1]。目前,各地種植的天麻以烏天麻、紅天麻為主,也有少量綠天麻及雜交品種,不同品種天麻在生物性狀和質量上有差異[2]。現通過對比研究不同品種天麻的形態組織學來提供品種鑒定依據。

    1實驗部分

    1.1儀器與材料CH-20-BIM型生物顯微鏡(日本Olympus);JSM-6390LV型掃描電子顯微鏡、CO2超臨界流體萃取儀、IB-5型離子濺射儀(日本日產)。15批供試對口藥材和原植物標本收集于四川、貴州、云南、湖北、陜西等省,經馬逾英教授鑒定為蘭科植物烏天麻GastrodiaelataBl.f.glaucaS.Chow、紅天麻G.elataBl.f.elata、綠天麻G.elataBl.f.viridis(Maki-no)Makino。

    1.2方法與結果

    1.2.1原植物的形態觀察樣品收集地栽培的不同品種天麻植株及原植物標本,并參考《中國植物志》[1]描述其植物形態。烏天麻的植株高113~157(~160)cm,塊莖橢圓形,肉質,長8~12cm,直徑3~5(~7)cm,厚2.0~3.5cm,具較密的節,節上被多數三角狀寬卵形的鞘。莖直立,淺灰褐色,葉退化成膜質磷片。總狀花序頂生,具30~50朵花;花苞片披針形或狹披針形,膜質;花梗和子房長略短于花苞片;花烏黃色;萼片和花瓣合生成的花被筒長約1cm,近圓筒形,筒的基部向前方凸出,頂端具5枚裂片,唇瓣長圓狀卵圓形,黃色;雄蕊1枚,著生于雌蕊上端;子房扭轉。紅天麻與烏天麻的區別為塊莖表面環節上的潛伏芽常有凹陷。植株高107~124(~132)cm,莖橙紅色,花序長26~31(~32)cm,花橙黃色,唇瓣橙黃。綠天麻與烏天麻的區別為植株高98~102(~111)cm,莖黃綠色,花序長22~27(~29)cm,花黃綠色,唇瓣黃綠色(圖1)。

    1.2.2性狀鑒別觀察各產地不同品種天麻樣品的形狀、大小、顏色、表面特征、質地、斷面、氣味等外觀性狀,并參考2010年版《中國藥典》[3]中描述的性狀特征。3個不同品種天麻在藥材外觀上無明顯區別,僅在形狀、大小及表面的環節上稍有差異。烏天麻呈橢圓形,略扁,皺縮而稍彎曲,長4~10cm,寬2.5~5.0cm,厚0.5~2.0cm。表面黃白色至淡黃棕色,具不規則縱皺紋,由潛伏芽排列成的橫環紋9~14個,偶可見棕褐色菌索。頂端有紅棕色鸚嘴狀的芽或殘留莖基;基部有圓臍形瘢痕[4-5]。質堅,不易折斷,斷面較平坦,黃白色至淡棕色,角質樣。氣微,味甘。紅天麻與烏天麻的區別為呈長橢圓形或長條形,表面橫環紋11~18個,基部有圓臍形瘢痕較烏天麻小。綠天麻與烏天麻的區別為多為長條形,下端稍尖,表面橫環紋12~17個,基部圓臍形瘢痕較烏天麻小(圖2)。

    1.2.3顯微鑒別采用徒手切片、石蠟切片、粉末制片、顯微攝影等方法,粉末圖用顯微描繪鏡繪制。烏天麻表皮偶有殘留,下皮由3~4列切向延長的栓化細胞組成,下皮細胞扁橢圓形。皮層為7~8列多角形細胞,皮層最外層細胞長橢圓形,切向延長,有的皮層細胞中含草酸鈣針晶束。中柱占絕大部分,有小型周韌維管束散在;薄壁細胞內亦含草酸鈣針晶束。紅天麻與烏天麻的主要區別為下皮細胞4列以上,其細胞為橢圓形或多角形,近皮層1~2列下皮細胞栓化。皮層細胞7~9列,最外層細胞排列緊密呈類方形。綠天麻與烏天麻在橫切面上沒有明顯的區別。3個不同品種天麻橫切面組織特征比較(表1、圖3)。常規顯微觀察,3個不同品種天麻的粉末特征無明顯的區別。粉末黃白色或黃棕色。薄壁細胞中可見糊化多糖團塊;厚壁細胞橢圓形或類多角形,直徑80~153μm,壁厚3~8μm,木化,紋孔明顯。偶見草酸鈣針晶成束,長28~68(~89)μm。螺紋導管、網紋導管及環紋導管直徑7~25μm(圖4)。

    1.2.4花粉塊的掃描電鏡觀察用2.5%戊二醛溶液(PBS配制、pH7.2)固定花粉塊,于4℃冰箱中保存。使用上升系列的乙醇(20%~100%)各脫水20min后,置CO2超臨界流體萃取設備中進行干燥,將干燥樣品粘于固定臺上,經IB-5型離子濺射儀噴金后,置掃描電子顯微鏡下觀察,拍照記錄各花粉塊的外表結構特征。天麻花粉塊由眾多花粉粒相互堆積而成,相鄰花粉粒之間有明顯的溝回;花粉粒多呈不規則四邊形或多邊形,表面呈網狀紋理,可見網孔,花粉塊上常有黏液物質(絲狀、線狀或堆積存在)。除上述共同特征外,不同品種天麻在花粉單粒大小、網紋疏密、網脊寬窄方面有差異:烏天麻的花粉單粒大小為(10.3~19.7)×(7.7~14.3)μm,網紋緊密,網脊寬度為0.77~1.88(1.97)μm;紅天麻花粉單粒大小為(12.4~22.5)×(6.4~14.1)μm,疏松,網脊寬度為0.55~0.99(1.01)μm;綠天麻花粉單粒大小為(13.7~26.8)×(9.1~14.5)μm,較緊密,可見網孔,網脊寬度為0.44~0.99(1.54)μm。不同品種天麻花粉塊的掃描電鏡特征比較見圖5。

    2討論

    文中通過對比研究了3種天麻的形態組織學,找出了其原植物形態、藥材性狀、組織結構及花粉塊的主要鑒別特征。原植物形態主要從植株的高矮、莖的顏色、花的顏色進行鑒別:烏天麻植株高113~157(~160)cm,莖淺灰褐色,花烏黃色;紅天麻植株高107~124(~132)cm,莖橙紅色,花橙黃色;綠天麻植株高98~102(~111)cm,莖黃綠色,花黃綠色。藥材性狀方面,主要從藥材形狀、大小及表面的環節這3點來鑒別3個不同品種的天麻。組織結構方面,紅天麻下皮細胞4列以上,其細胞為橢圓形或多角形,近皮層1~2列下皮細胞栓化,皮層細胞7~9列,最外層細胞排列緊密呈類方形。以此與綠天麻和烏天麻進行區別。花粉塊電鏡掃描顯示:同一產地不同品種的天麻花粉塊的整體形態相似,均由眾多花粉粒組成。花粉粒多呈不規則四邊形或多邊形,表面具網狀紋理,可見網孔;花粉塊上常有黏液物質。而不同品種天麻花粉塊在單粒花粉大小、網紋疏密度、網脊寬度等方面存在差異。

    參考文獻:

    [1]中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志[M].北京:科學出版社,2006,18:29-30.

    [2]余昌俊,王紹柏.天麻6個品種重要性狀比較分析[J].生物學通報,2010,45(3):12-14.

    [3]中華人民共和國國家藥典委員會.中國藥典[S].北京:中國醫藥科技出版社,2010:54.

    [4]鄧恒青,童紅,周漢華.天麻環節紋上的點狀痕是根還是芽[J].中國民族民間醫藥,2010,11:15.

    [5]鄧恒青,童紅,周漢華.天麻顯微鑒定拾遺[J].中國民族民間醫藥,2009,13:9.

    作者:李振斌 鄧薇 徐大東 宗露 楊芝芳 張彩虹 馬逾英 單位:成都中醫藥大學 中藥資源系統研究與開發利用省部共建國家重點實驗室培育基地

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