抗癌止痛膏治療癌性疼痛的實(shí)驗(yàn)分析范文

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【摘要】目的研究中藥外用止痛配方的鎮(zhèn)痛作用。方法：將實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)為抗癌止痛膏組、生理鹽水組、嗎啡對(duì)照組以及抗癌止痛膏加嗎啡組，觀察中藥外用止痛配方對(duì)熱板法疼痛小鼠及冰醋酸致痛小鼠反應(yīng)的影響，觀察中藥外用止痛配方的鎮(zhèn)痛效果和鎮(zhèn)痛機(jī)制。結(jié)果：抗癌止痛膏可拮抗冰醋酸所致疼痛扭體反應(yīng)，減少單位時(shí)間扭體次數(shù)。抗癌止痛膏組痛閾值在90min時(shí)開始與生理鹽水組有明顯差異，明顯高于生理鹽水組，給藥120min時(shí)痛閾值最高，效果最佳，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，超過120min，痛閾值開始下降。抗癌止痛膏在48小時(shí)時(shí)機(jī)械痛閾值最高，72小時(shí)開始下降?？拱┲雇锤嘟M能明顯降低大鼠血液中的IL-1、TNF-α含量。結(jié)論：抗癌止痛膏具有鎮(zhèn)痛作用，其鎮(zhèn)痛機(jī)制可能與其抑制外周血炎癥因子IL-1、TNF-α有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】癌性疼痛；中醫(yī)藥；外治法；鎮(zhèn)痛；實(shí)驗(yàn)研究

癌性疼痛[1]是癌癥患者常見伴隨癥狀之一，亦是癌癥患者最難忍受的癥狀之一，是影響患者生活質(zhì)量的重要因素，據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球癌癥患者中約50%有不同程度的癌痛。非甾體類抗炎鎮(zhèn)痛藥和/或阿片類藥物療效確切，但其毒副作用使得其在臨床使用方面受到限制，近年來，中醫(yī)學(xué)以其獨(dú)特的理論體系，開展對(duì)癌性疼痛的治療研究，取得了確切的療效。中藥外用經(jīng)皮膚吸收，就近作用于患病局部，作用直接，避免了口服經(jīng)消化道吸收所遇到的多環(huán)節(jié)滅活作用，副作用較小，臨床療效確切。本文通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究探討中藥抗癌鎮(zhèn)痛膏的安全性、鎮(zhèn)痛作用及可能的作用機(jī)制，旨在中西醫(yī)結(jié)合，探索一種療效可靠、經(jīng)濟(jì)使用方便、不良反應(yīng)少的癌痛綜合治療方案。

1材料與方法

1.1藥物與試劑

抗癌止痛膏是由：附片、桂枝、紅花、澤蘭、牽牛子、甘遂等組成，由宜昌市中醫(yī)院制劑室將其制成超細(xì)粉，加入一定基質(zhì)混合，制成藥膏。使用時(shí)將其直接涂于跟疼痛范圍大小適宜的醫(yī)用棉墊上，后將棉墊覆蓋于疼痛部位以固定。鹽酸嗎啡注射液，批號(hào)1012501056754836，IL-1、PGE2、TNF測(cè)試藥盒購(gòu)自武漢博能生物有限公司。

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

昆明種小鼠，清潔級(jí)，雌雄各半，體重18～22g；wistar大鼠，清潔級(jí)，雌性各半，體重150～200g。均由三峽大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。所有動(dòng)物均在恒溫恒濕的動(dòng)物室飼養(yǎng)一周后進(jìn)行試驗(yàn)。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1急性毒性實(shí)驗(yàn)1.3.1.1大鼠急性毒性試驗(yàn)取wistar大鼠10只，雌雄各半，將鼠尾包裹中藥抗癌止痛膏，包裹3小時(shí)將大鼠取出，觀察72小時(shí)。觀察指標(biāo)與小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)相同。1.3.1.2小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)昆明種正常小白鼠10只，雌雄各半，于鼠尾涂擦中藥抗癌止痛膏，2小時(shí)一次，連續(xù)涂擦6次，每日觀察小鼠給藥后活動(dòng)情況，有無皮膚充血水腫，滲出及皮疹。1.3.2急性疼痛實(shí)驗(yàn)采用腹腔注射0.6%的冰醋酸10mL/kg復(fù)制小白鼠疼痛模型40只（表現(xiàn)為扭體反應(yīng)），隨機(jī)分為四組：A抗癌止痛膏組、B生理鹽水組、C嗎啡對(duì)照組以及D抗癌止痛膏加嗎啡組，每組各10只。A、B組小鼠分別于腹部涂擦適量中藥抗癌止痛膏（約5g/只）和生理鹽水，C組背部外敷空白醫(yī)用布膠膏，皮下注射嗎啡（每天20mg/kg），D組小鼠每只腹部涂擦適量中藥抗癌止痛膏（約5g/支），同時(shí)皮下注射嗎啡（每天20mg/kg）。中藥抗癌止痛膏為每20分鐘涂擦一次，連續(xù)5次，最后一次涂藥30分鐘后，觀察每組小鼠開始出現(xiàn)扭體反應(yīng)的時(shí)間和30分鐘內(nèi)各小鼠的扭體反應(yīng)次數(shù)以及抑制率，抑制率=（給藥組扭體次數(shù)-生理鹽水組扭體次數(shù)）/生理鹽水組扭體次數(shù)，分別比較組間差異。采用熱板法復(fù)制小鼠疼痛模型，將小鼠放在（55±1）℃的熱板上，測(cè)定每鼠的痛閾（小鼠從足接觸熱板到舔足和跳躍后足所用時(shí)間），每只測(cè)兩次，每次間隔5min，選擇痛反應(yīng)潛伏期在5～30s的小鼠納入實(shí)驗(yàn)，剔除過敏（＜5s）或反應(yīng)遲鈍（＞30s）的個(gè)體。24h后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，取合格小鼠40只，隨機(jī)分四組，分組方法和給藥處理同扭體實(shí)驗(yàn)。比較各組痛閾變化。1.3.3慢性疼痛實(shí)驗(yàn)取SD大鼠60只雌雄各半，隨機(jī)分為ABCD四組，分組方法同急性疼痛實(shí)驗(yàn)。各組大鼠左側(cè)脛骨干骺端骨髓腔內(nèi)注射10μLWalker256腫瘤細(xì)胞懸液（細(xì)胞密度為1×105個(gè)/10μL/只大鼠），10天后建立骨癌痛大鼠模型（每組至少10只），按照急性疼痛實(shí)驗(yàn)的方法立即對(duì)各組大鼠進(jìn)行處理，1天1次，連續(xù)3天，每天換藥。分別觀察用藥處理后的30分鐘、12小時(shí)、48小時(shí)以及72小時(shí)的痛閾變化。方法采用機(jī)械性痛覺超敏Von-Frey閾值測(cè)定：將大鼠放入特制的有機(jī)玻璃籠中，待其適應(yīng)30min后進(jìn)行測(cè)量。將Von-Frey纖維毛刺激大鼠后肢足底中部，刺激強(qiáng)度以0.29的毛刺開始，逐漸加力使毛針彎曲，至超過原軸線的1cm，若大鼠不出現(xiàn)縮足，則換大一級(jí)力度的毛針，直至大鼠出現(xiàn)縮足，記錄此時(shí)的Von-Frey纖維毛刺值為Von-Frey閾值。最大力度為18.5g，大于此值時(shí)記為18.5g。每次刺激間隔5min，連續(xù)測(cè)定3次，取平均值。全部實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，每組隨機(jī)挑選5只大鼠，采用心臟取血，先用10%水合氯醛以400mg/kg腹腔注射麻醉大鼠，然后快速打開胸腔暴露心臟，持10mL注射器經(jīng)左心室插入抽取5～8mL血液標(biāo)本，測(cè)定大鼠血清中白介素-1（IL-1），腫瘤壞死因子-α（TNF-α），前列腺素E2（PGE2）水平分析，具體操作按測(cè)試劑盒說明書要求進(jìn)行。

2實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

于鼠尾涂擦中藥抗癌止痛膏，大小鼠行為正常，未出現(xiàn)死亡、精神不佳、松毛、厭食等情況，局部皮膚均無紅斑和水腫等刺激。

2.2急性疼痛實(shí)驗(yàn)結(jié)果

抗癌止痛膏可拮抗冰醋酸所致疼痛扭體反應(yīng)，減少單位時(shí)間扭體次數(shù)（見圖1）?？拱┲雇锤嘟M痛閾值在90min時(shí)開始與生理鹽水組有明顯差異，明顯高于生理鹽水組，給藥120min時(shí)痛閾值最高，效果最佳，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，超過120min，痛閾值開始下降。見表1。

2.3慢性疼痛實(shí)驗(yàn)結(jié)果

抗癌止痛膏組、嗎啡組、嗎啡+抗癌止痛膏組機(jī)械痛閾值明顯高于生理鹽水組，抗癌止痛膏在48小時(shí)時(shí)機(jī)械痛閾值最高，72小時(shí)開始下降（見表2）?？拱┲雇锤嘟M能明顯降低大鼠血液中的IL-1、TNF-α含量（見表3）。

3討論

中醫(yī)學(xué)對(duì)疼痛的病機(jī)論述明確，即實(shí)證的“不通則痛”和虛證的“不榮則痛”。癌性疼痛的病機(jī)多端，而癌毒內(nèi)郁、痰瘀互結(jié)、經(jīng)絡(luò)壅塞是癌性疼痛的基本病機(jī)。癌毒內(nèi)郁是病機(jī)之關(guān)鍵，痰瘀是主要病理因素，“正氣存內(nèi)，邪不可干”，正氣虧虛是重要內(nèi)在因素。故解毒祛瘀、化痰通絡(luò)是其基本治療大法[2]。因此，本研究中的“桂附止痛膏”選取制附片、桂枝以散寒止痛、溫經(jīng)通脈，紅花、澤蘭、阿魏以活血通經(jīng)、散瘀止痛，甘遂配牽牛，可加強(qiáng)消痰滌飲之功效以消腫散結(jié)鎮(zhèn)痛。諸藥合用，共奏溫陽(yáng)通絡(luò)理氣，化瘀逐水鎮(zhèn)痛之功?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，癌性疼痛的機(jī)制獨(dú)特而復(fù)雜，既具有炎癥痛及神經(jīng)病理痛的特征，又是與炎癥痛和神經(jīng)病理痛相區(qū)別的一種痛[3]。腫瘤細(xì)胞和相關(guān)的免疫細(xì)胞，包括巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和T細(xì)胞，能釋放一系列的潛在的致痛因子、如前列腺素、內(nèi)皮素、白細(xì)胞介素-1、白細(xì)胞介素-6、緩激肽、腫瘤壞死因子-α（tumornecrosisfactor-α,TNF-α）、神經(jīng)生長(zhǎng)因子（nervegrowthfactor,NGF）和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TransforminggrowthFactorbeta,TGF-β）等，通過致敏外周傷害性感受器或直接激活初級(jí)傳入神經(jīng)元上的特異受體而發(fā)揮作用，導(dǎo)致癌痛的產(chǎn)生和維持[4]。桂附止痛膏降低了大鼠血液中的IL-1、TNF-α含量，達(dá)到止痛作用。綜上所述，本實(shí)驗(yàn)從動(dòng)物疼痛模型證實(shí)了桂附止痛膏的急、慢性鎮(zhèn)痛作用，并證實(shí)其鎮(zhèn)痛機(jī)制可能與其抑制外周血炎癥因子有關(guān)。其他鎮(zhèn)痛機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]何杰,陳新日,李廣宇.中醫(yī)外治法治療癌性疼痛臨床應(yīng)用研究概述[J].中醫(yī)臨床研究,2014,6(19):147-148

[2]程海波,吳勉華.癌性疼痛的中醫(yī)理論探討.中華中醫(yī)藥雜志,2008,23(1):50-51

[3]張瑛,韓濟(jì)生,王韻.癌癥痛的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制研究進(jìn)展[J].生理科學(xué)進(jìn)展,2004,35(3):224-228.

作者：高元喜 鄧艷芳 鄧?yán)钊?單位：三峽大學(xué)中醫(yī)臨床醫(yī)學(xué)院